Testi za boreliozo - kako izgledajo in kakšni so stroški testov za boreliozo

Preiskave borelioze je treba opraviti vsakič, ko se zgodi ugriz klopa. Na začetek diagnoze morate počakati do nekaj tednov. Pred tem lahko preizkusite klopa, ki nas je ugriznil, da ugotovite, ali je nosilec kakršne koli bolezni. Kakšno je testiranje na boreliozo in kakšna je cena testov?

Lymsko bolezen (bakterijsko bolezen, ki se prenaša s klopi in jo povzroča Borrelia burgdorferi in njene sorte) je priporočljivo opraviti čim prej po ugrizu klopa.

Pri diagnozi lymske borelioze se uporabljajo posebne diagnostične sheme, ki temeljijo predvsem na seroloških metodah.

Vendar pa lahko Lymeova bolezen ob upoštevanju zapletenega patomehanizma bolezni in omejitev laboratorijskih metod povzroči številne diagnostične težave.

Zato je na trgu vedno več laboratorijskih testov, ki bi lahko rešili to težavo. Na žalost večina od njih nima dokazane diagnostične vrednosti in se jih ne sme uporabljati pri rutinski diagnozi borelioze.

Kazalo:

1. Zgodnja lokalna borelioza - laboratorijski testi
2. Zgodaj razširjena Lymska bolezen - test za Lymsko bolezen
3. Pozno lajmska bolezen - kakšni testi za odkrivanje borelioze?
4. Lymska borelioza - spremljanje zdravljenja
5. Lymska bolezen - imunski kompleksi v obtoku
6. Lymska bolezen - test preoblikovanja limfocitov (LTT)
7. Lymska bolezen - test CD57
8. Berlioz - ELFA in CLIA test
9. Lymska bolezen - pregled klopa, odstranjenega s kože

Zgodnja lokalna borelioza - laboratorijski testi

V tej fazi po stiku z okuženim klopom pride do lokalne okužbe in t.i. migrantski eritem (latinsko erythema migrans), ki je simptom, značilen za boreliozo.

Prisotnost eritema na mestu ugriza klopa zadostuje za ugotavljanje okužbe z borelijo. Zgodnja faza lokalne borelioze traja nekaj dni do približno 4 tedne in pri bolniku se lahko pojavijo gripi podobni simptomi.

To je najzgodnejša stopnja okužbe, pri kateri lahko serološke metode (ELISA in Western blot), ki testirajo na prisotnost protiteles IgM in IgG, dajo lažno negativne rezultate. V tej fazi se imenujejo tako imenovani serološko okno, ki je začetno obdobje okužbe, ko telo še ne proizvaja protiteles proti boreliji.

Prva protitelesa IgM se pojavijo okoli 2. tedna bolezni, vendar pri večini ljudi njihovo prisotnost zaznajo šele čez nekaj tednov. V primeru negativnega serološkega rezultata je treba test ponoviti približno 3-4 tedne po okužbi.

ELISA in Western blots povrne Nacionalna zdravstvena blagajna, vendar mora napotljivi zdravnik imeti razloge, da jih odredi. Zasebno stane test ELISA od 30 do 100 PLN, Western blot pa od 80 do 200 PLN.

Molekularni pregled s PCR se lahko obravnava v zelo zgodnji fazi okužbe. Metoda zazna bakterijski genski material (DNA), ki ga je v telesni tekočini največ v zgodnji fazi okužbe. Daljši kot je čas od okužbe, manj verjetno je, da odkrijejo bakterijsko DNA.

Vendar je treba upoštevati, da na Poljskem še vedno ni standardizacije molekularnih metod pri diagnozi Lymejeve bolezni, zato ta metoda ni priporočljiva kot diagnostično orodje. Nacionalni zdravstveni sklad ne povrne molekularnega testiranja in stane med 160 in 200 PLN.

Vredno vedeti

Stopnje okužbe z Borrelia burgdorferi:

• zgodnja lokalna Lymska bolezen
• zgodaj razširjena Lymska bolezen
• pozna borelioza

Preberite tudi: Eritem tava po ugrizu klopa. Kako ga prepoznati? Cepivo proti klopnemu encefalitisu

Zgodaj razširjena Lymska bolezen - test za Lymsko bolezen

Na stopnji zgodnje razširjene borelioze je okuženih veliko organov, sklepov, mišic, živčnega in kardiovaskularnega sistema. Zgodnja lymska bolezen se razvije z glavoboli, vnetjem obraznega živca, utrujenostjo ali otrdelostjo vratu. Ta faza traja približno nekaj tednov po okužbi.

Na stopnji zgodnje razširjene Lymske bolezni so v glavnem prisotna protitelesa IgM. V 6-8 tednih po okužbi se začnejo pojavljati tudi protitelesa IgG. Zato so serološke metode osnova diagnostike na tej stopnji okužbe.

Serološka diagnoza lymske borelioze se začne s presejalno fazo, to je izvedbo občutljivega testa ELISA.

Če je rezultat negativen, to pomeni, da spirohete borelije niso zaznane ali pa je rezultat lažno negativen. Če je rezultat pozitiven ali šibko pozitiven, je treba za potrditev rezultatov metode ELISA opraviti potrditveno Western blot testiranje, ki je zelo specifično.

Če sumimo na nevroboreliozo, lahko izvedemo molekularno PCR testiranje iz cerebrospinalne tekočine. Metoda PCR je zelo občutljiva in glede na to, da je število spirohet borelije v cerebrospinalni tekočini majhna, bo morda v pomoč pri postavitvi diagnoze.

Vendar brez predhodnega serološkega testiranja to ne pomeni diagnoze okužbe.

Pozno lajmska bolezen - kakšni testi za odkrivanje borelioze?

Zadnja stopnja okužbe je pozna Lymska bolezen, pri kateri pride do nadaljnjega širjenja bakterij na organe in nastajanja vedno hujših zapletov okužbe. Pojavijo se pozno lajmska bolezen, sklepna lajmska bolezen ali atrofični dermatitis. Pozno lajmska bolezen lahko traja tudi do nekaj let.

Na tej stopnji okužbe se s serološkimi metodami odkrijejo le protitelesa IgG. Visoke ravni IgG proti borelijskim spirohetam in komorbidnost simptomov kažejo na boreliozo. Vendar pa lahko v nekaterih primerih (zlasti pri ljudeh, ki so v zgodnjih fazah okužbe zelo hitro prejemali antibiotično terapijo) protitelesa IgM vztrajajo tudi več let. V takih situacijah ta protitelesa ne kažejo na aktivno okužbo.

Kaj je lajmska bolezen?

Lymska borelioza - spremljanje zdravljenja

Ena največjih težav pri diagnozi borelioze je pomanjkanje občutljivih in specifičnih laboratorijskih označevalcev, ki bi lahko ocenili učinkovitost antibiotične terapije. Privzeto se za oceno njegove učinkovitosti uporablja opazovanje simptomov bolezni.

Raziskave kažejo, da se za določanje ravni protiteles IgM in IgG proti antigenu spirohete VLsE / C6 lahko uporablja za spremljanje učinkovitosti okužbe z borelijo.

Spiralni protein VlsE / C6 povzroča zelo močan in hiter odziv imunskega sistema. Dodajanje tega antigena nizu seroloških testov znatno poveča občutljivost testa. Prisotnost protiteles IgG proti beljakovinam VLsE / C6 pri bolnikih z boreliozo je:

• 20-50% pri bolnikih v zgodnji fazi okužbe
  
  
• 70-90% pri bolnikih z zgodnje diseminirano boreliozo
  
  
• skoraj 100% pri bolnikih s pozno boreliozo

Nacionalni zdravstveni sklad ne povrne pregleda in stane med 80-150 PLN.

Lymska bolezen - imunski kompleksi v obtoku

Serološki testi so osnova za diagnozo borelioze. Vendar obstajajo klinične situacije, zaradi katerih so lahko ti testi lažno negativni. Ena izmed njih je prisotnost t.i. imunski kompleksi, ki so sestavljeni iz antigenov borelije in specifičnih protiteles IgM ali IgG.

Imunski kompleksi blokirajo protitelesa, zato jih s serološkimi metodami ni mogoče zaznati, zato lahko povzročijo lažno negativne rezultate. Ta težava se pojavlja predvsem pri zelo intenzivnih okužbah.

Če ima pacient očitne simptome lymske borelioze in so rezultati testa negativni, nekateri laboratoriji ponujajo test, ki vključuje kemično razgradnjo imunskih kompleksov. Namen tega zdravljenja je sprostiti protitelesa in šele nato izmeriti njihovo koncentracijo.

Raziskave kažejo, da lahko uporaba takega postopka pred serološkim testiranjem znatno poveča odkrivanje protiteles proti antigenom borelije. Vendar se ta metoda zaradi pomanjkanja standardizacije v laboratorijih ne uporablja rutinsko.

Cena testa se giblje med 110–210 PLN (za protitelesa IgM ali IgG) in ga Nacionalni zdravstveni sklad ne povrne.

Lymska bolezen - test preoblikovanja limfocitov (LTT)

Test preoblikovanja limfocitov (LTT) se uporablja na različnih področjih medicine, vključno z v transplantologiji, alergologiji in posredno pri diagnozi borolijskih spirohet. Pri diagnozi lymske borelioze test ugotavlja prisotnost imunskih celic (limfocitov T) v pacientovi krvi, ki so bile v stiku z bakterijami. Test uporablja ELISPOT tehniko, katere princip je podoben metodi ELISA, vendar je bolj občutljiv od njega.

Nekateri navajajo, da je treba LTT testiranje na spirehete Borrelia opraviti tako, da:

• potrditev aktivne okužbe pri ljudeh s pozitivnimi rezultati seroloških preiskav, vendar brez simptomov, ki jasno kažejo na bolezen
  
  
• potrditev aktivne okužbe pri osebah z negativnimi ali mejnimi serološkimi testi, vendar s kliničnimi simptomi bolezni
  
  
• spremljanje okužbe po zdravljenju z antibiotiki
  
  
• ocena ponovitve lymske borelioze

V skladu s priporočili delovne skupine, objavljenimi leta 2014, tako test LTT kot določitev ravni protiteles v imunskih kompleksih v obtoku pri diagnozi lymske borelioze ni priporočljiv.

Te metode morajo še biti potrjene (tj. Potrditev njihove zanesljivosti), da bi bile uporabno diagnostično orodje.

Cena testa se giblje med 400–550 PLN in ga Nacionalni zdravstveni sklad ne povrne.

Lymska bolezen - test CD57

Površinski marker CD57 je beljakovina, ki se pojavi na površini imunskih celic - NK celic (Natural Killers).

Zdravniki iz skupine ILADS, to je Mednarodnega združenja za boreliozo in sorodne bolezni, menijo, da je v kronični fazi lymske bolezni imunski sistem potlačen, kar se kaže v zmanjšanju populacije NK celic z markerjem CD57.

Predvidevajo, da se z merjenjem njihovega števila v krvi lahko oceni aktivnost bolezni. Tako kot pri metodi LTT in motnjah imunskih kompleksov tudi ta metoda zahteva potrditev. Cena testa se giblje okoli 170 PLN in ga Nacionalni zdravstveni sklad ne povrne.

Več o testu CD57 najdete tukaj.

Berlioz - ELFA in CLIA test

Pri diagnozi lymske borelioze se primarno uporablja metoda ELISA (encimsko vezani imunosorbentni test). Številni laboratoriji pa uporabljajo tudi druge serološke metode, kot je ELFA (encimsko vezana fluorescentna analiza), opravljena z Vidasom® in CLIA (kemiluminiscenčni imunološki test), opravljena z analizatorjem Liaison®.

Kako se razlikujejo? Načelo delovanja treh metod je zelo podobno in uporablja specifična protitelesa in njihovo sposobnost vezave na antigene. Metodi ELFA in CLIA omogočata avtomatizacijo analiz in hitrejše izvajanje testov v laboratoriju. Te metode lahko zaznajo tudi nižje koncentracije protiteles v testiranem biološkem materialu.

Kar zadeva zanesljivost rezultatov, dobljenih s tremi metodami, so ti skoraj enaki. Pozitivne ali šibke pozitivne rezultate, dobljene z metodama ELFA in CLIA, tako kot pri metodi ELISA, je treba potrditi z Western blot analizo.

Vredno vedeti

Lymska bolezen - pregled klopa, odstranjenega s kože

Nekateri laboratoriji ponujajo testiranje klopa, odstranjenega s kože, na prisotnost borelijske DNA. V skladu s priporočili delovne skupine, objavljenimi leta 2014, taka študija absolutno ni diagnostična metoda borelioze.

Čeprav je tveganje za prenos bakterij s klopov na človeka sorazmerno s časom sesanja krvi, prisotnost DNK spirohete v klopu ni sinonim za okužbo in njegova odsotnost ne izključuje okužbe.

Zagovorniki metode menijo, da je koristno pri odločitvi o uvedbi antibiotične terapije pri ljudeh s simptomi, ki kažejo na Lymsko bolezen, vendar brez prisotnosti selivskega eritema. Cena takih anketirancev se giblje med 100–500 PLN in jih Nacionalni zdravstveni sklad ne povrne.

Literatura

1. Laboratorijska diagnoza bolezni, ki se prenašajo s klopi. Priporočila delovne skupine: Nacionalna zbornica laboratorijskih diagnostikov, Nacionalni inštitut za javno zdravje-Nacionalni inštitut za higieno, nacionalni svetovalec na področju nalezljivih bolezni, Oddelek za nalezljive bolezni in nevroinfekcije, Medicinska univerza v Białystoku, Poljsko društvo za virusologijo, Varšava 2014.
2. Rychlik U. et al.Laboratorijska diagnostika testa preoblikovanja limfocitov (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
3. Marques A. R. Laboratorijska diagnoza borelioze - napredek in izzivi. Infect Dis Clin North Am. 2015; 29 (2): 295–307.
4. Marques A. et al. Število naravnih celic morilcev se ne razlikuje med bolniki s sindromom post-Lymejeve bolezni in kontrolami. Clin Vaccine Immunol. 2009; 16: 1249-1250.
5. Krzemień P. J. Pomen antigena Vlse / C6 kot označevalca pri diagnozi zgodnje lymske borelioze in proučevanju njene učinkovitosti. Zdravstveni problemi civilizacije 2017; 11 (2): 87-92.
6. Miąskiewicz K. et al.Predlog novega metodološkega pristopa in interpretacija rezultatov protiteles proti Borrelia burgdorferi - analiza sestave protiteles v imunskih kompleksih v obtoku. Revmatologija 2011; 49, 5: 328–334.
7. Muraczyńska B. in Gałęziowska E. Polemike v zvezi z diagnozo in zdravljenjem borelioze v svetu. Splošna medicina in zdravstvene vede, 2015; 21 (4): 372–377.

O avtorju

Karolina Karabin, dr. Med., Molekularni biolog, laboratorijski diagnostik, Cambridge Diagnostics Polska Biolog s specializacijo iz mikrobiologije in laboratorijski diagnostik z več kot 10-letnimi izkušnjami v laboratorijskem delu. Diplomant šole za molekularno medicino in član poljskega Društva za človeško genetiko, vodja raziskovalnih štipendij v Laboratoriju za molekularno diagnostiko na oddelku za hematologijo, onkologijo in notranje bolezni Medicinske univerze v Varšavi. Na 1. medicinski fakulteti Medicinske univerze v Varšavi je zagovarjala naziv doktorice medicinskih znanosti s področja medicinske biologije. Avtor številnih znanstvenih in poljudnoznanstvenih del s področja laboratorijske diagnostike, molekularne biologije in prehrane. Vsak dan kot strokovnjak na področju laboratorijske diagnostike vodi vsebinski oddelek pri Cambridge Diagnostics Polska in sodeluje z ekipo nutricionistov na dietetični kliniki CD. Svoje praktično znanje o diagnostiki in dietni terapiji bolezni deli s strokovnjaki na konferencah, izobraževanjih ter v revijah in spletnih straneh. Zanima jo predvsem vpliv sodobnega življenjskega sloga na molekularne procese v telesu.